单克隆抗体制备
单克隆抗体是由一个抗体分泌型B淋巴细胞与一个骨髓瘤细胞融合而形成的杂交廇细胞经无性繁殖而来的细胞群所产生的,它的免疫球蛋白属同一类型,而且它是针对某一抗原决定簇的,因此特异性强,亲合性也一致
免疫组化(IHC)检测
原理和过程:石蜡切片复水后,抗原修复,孵育特异性一抗,生物素标记的二抗,HRP标记的结合素,最终DAB显色,苏木素复染,封片,照相。应用:待检蛋白质分子在组织上进行定位,定量分析,以及通过标志分子确
酶联免疫吸附实验
酶联免疫吸附实验(ELISA) 即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等,具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。
质粒转染表达检测(WB)
融合tag(如flag等)或marker基因(如GFP)的外源基因真核表达质粒转染目的细胞(如293T细胞)后,继续培养一定时间,之后收集细胞提取总蛋白,Western Blot方法检测外源基因的表达
